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¿Qué hace una enzima de restricción?
Una enzima de restricción es una enzima aislada de una bacteria que corta la molécula de ADN en secuencias específicas. El aislamiento de estas enzimas es fundamental para el desarrollo de la tecnología de ADN recombinante (ADNr) y la ingeniería genética.
¿Qué es una unidad de enzima de restricción?
Una unidad de enzima de restricción se define como la cantidad de actividad de la enzima que va a digerir 1 µg de ADN de lambda a 37°C en una hora bajo las condiciones de ensayo definidas.
¿Qué es una enzima de restricción PDF?
Las enzimas de restricción son nucleasas que cortan ADN de doble cadena cuando reconocen un patrón de secuencia específico. Generan fragmentos de ADN conocidos como fragmentos de restricción. Las enzimas de restricción son herramientas imprescindibles en biología molecular, ingeniería genética y biotecnología.
¿Qué es nucleasa en biologia?
Enzima que rompe la columna vertebral del ARN o del ADN. La rotura de una hebra genera un corte y la rotura de ambas hebras genera una rotura de doble hebra. Una endonucleasa corta en medio del ARN o ADN, mientras que una exonucleasa corta en el extremo de la hebra.
¿Cómo se hace un mapa de restricción?
Para poder realizar un mapa, se ha de cortar una muestra del ADN a mapear con una enzima de restricción, una segunda muestra del mismo ADN con otra enzima diferente y una tercera muestra de dicho ADN con las dos enzimas simultáneamente (digestión doble).
¿Qué son las enzimas de restricción?
Las enzimas de restricción que a pesar de ser distintas y provenir de distintas especies, tienen la misma secuencia de reconocimiento y dejan el mismo extremo cohesivo, pero no cortan en el mismo sitio, son llamadas Isoesquizómeros. Por ejemplo, están los Isoesquizómeros Asp 718 y Kpn1.
¿Cuáles son las enzimas de restricción del ADN?
El ADN propio no es reconocido por sus enzimas de restricción, puesto que previamente lo ha modificado por metilación a través de la acción de una metiltransferasa, enzima que transfiere grupos metilo desde S-Adenosil-Metionina (SAM) a bases específicas.
¿Cuál es la diferencia entre la metilasa y la enzima de restricción?
La metilasa suele ser una proteína monomérica, que introduce grupos metilo en una A o en una G (según la metilasa en cuestión), en ambas cadenas, dentro del sitio de reconocimiento. La enzima de restricción suele ser una proteína formada por dos subunidades del mismo tipo, ensambladas simétricamente.
¿Cuáles son los tipos de enzimas?
Tipo 1: Una sola enzima (con 3 subunidades) tiene actividad de restricción (corta) y modificación (metila). Al reconocer la secuencia específica de DNA corta al azar en sitios distintos al sitio de reconocimiento, ya sea río arriba o río abajo. El corte deja extremos cohesivos.