¿Qué factores pueden afectar en la migración de las moléculas en una electroforesis?
Factores que afectan a la electroforesis Resistencia (R): la movilidad de las moléculas es inversamente proporcional a ella. Intensidad (I) : cuantifica el flujo de carga eléctrica, se relaciona directamente con la distancia recorrida por las moléculas.
¿Cómo afecta el pH a la electroforesis?
Electroforesis de zona: las proteínas son moléculas anfóteras: su carga neta depende del pH del medio. Normalmente, la separación electroforética de proteínas se hace a pH alcalino, en el que la mayoría de las proteínas presentan una carga global negativa. A mayor carga y menor tamaño, más velocidad de migración.
¿Qué son las bandas de ADN separadas?
Las bandas de ADN separadas se utilizan a menudo para procedimientos adicionales, y se puede cortar una banda de ADN del gel como una rodaja, disolverla y purificarla.
¿Cuáles son las bandas menores de ADN?
Estas bandas menores pueden ser ADN mellado (forma circular abierta) y la forma circular cerrada relajada que normalmente se ejecuta más lentamente que el ADN superenrollado , y la forma monocatenaria (que a veces puede aparecer dependiendo de los métodos de preparación) puede avanzar por delante del ADN superenrollado. .
¿Cómo aumentar la intensidad de las bandas?
Para aumentar la diferencia en intensidad de las bandas, incluye el bromuro de etidio en el gel, en lugar de teñir tras acabar la electroforesis. La temperatura era desigual a lo largo del gel. Refrigera todo el gel uniformemente, o nada en absoluto. La concentración de tampón era diferente en el gel y en el tampón de electroforesis.
¿Qué es la electroforesis?
La electroforesis consiste en aplicar una corriente a través de un gel que contiene las moléculas de interés. Con base en su tamaño y carga, las moléculas se desplazarán por el gel en diferentes direcciones o a distintas velocidades, con lo que se separan unas de otras. [¿De dónde viene el nombre «electroforesis»?]