¿Qué es la reacción en cadena de la polimerasa?
Con esta técnica se pueden producir un billón de copias de la secuencia en estudio en sólo unas pocas horas. PCR, o la reacción en cadena de la polimerasa, es una reacción química que los biólogos moleculares utilizan para amplificar (crear copias) fragmentos de ADN.
¿Cuáles son los reactivos para la PCR?
Preparación de la muestra. En un tubo para PCR se agregan los siguientes reactivos: el ADN molde, los iniciadores, los nucleótidos o dNTPs, la solu-ción amortiguadora, el cloruro de magnesio (MgCl2), el agua y la ADN po-limerasa (Tabla 3), pueden agregarse otros compuestos que ayudan a la estabilidad de la polimerasa (ver Anexo 1).
¿Cómo se realiza la PCR?
En la actualidad, para llevar a cabo la PCR, únicamente se necesita mezclar en microtubos el ADNmolde, la polimerasa; los desoxirribonucleótidos adenina (dATP), guanina (dGTP), citosina (dCTP) y timina (dTTP); una solu- ción amortiguadora; un co-factor de la polimerasa (regularmente se usa mag- nesio) y los iniciadores (Anexo 1).
¿Qué enzimas se utilizan en la PCR?
Por estos motivos se hace necesaria la utilización de una enzima capaz de soportar y trabajar a altas temperaturas. La ADN polimerasa que normalmente se utiliza en la PCR se llama Taq polimerasa, la cual debe su nombre a la bacteria hipertermófila de la que se aisló (Thermus aquaticus).
Algunas veces llamada «fotocopiado molecular», la reacción en cadena de la polimerasa (RCP) es una técnica rápida y económica utilizada para «amplificar» – copiar – pequeños segmentos de ADN.
¿Cuáles son las funciones de la ARN polimerasa?
Además de la polimerización de los ribonucleótidos trifosfato, la ARN polimerasa tiene otras funciones como: Reconocer y unirse a localizaciones específicas o promotores de la molécula de ADN. Desenrollar parcialmente la molécula del molde de ADN, gracias a su actividad helicasa intrínseca. Sintetizar un ARN cebador para la elongación posterior.
¿Cuál es la estructura de la polimerasa?
La estructura de la ARN polimerasa presenta una ranura de 55 Å de longitud y una anchura 25 Å. Esta ranura permite el paso de la doble hélice de ADN que mide 20 Å. La longitud de 55 Å puede aceptar la secuencia de 18 nucleótidos.
¿Cuáles son los tipos de polimerasas nucleares?
El ARNP arqueano está formado por subunidades en número de 8 a 14. Por ejemplo, el ARNP de Sulfolobus shibatae presenta 13 subunidades. En las células eucariotas existen tres tipos de polimerasas nucleares de ARN (I, II y III), cada una especializada en la síntesis de un ARN determinado: