¿Que sucedería si colocamos agua destilada en lugar de tampón tanto en el gel de agarosa como dentro de la cámara de electroforesis?
4. ¿Qué sucedería si se utilizará agua destilada en lugar del Tampón de electroforesis en la cámara de electroforesis o en la solución del gel de agarosa? Como el agua destilada no contiene iones esto reducirá la conductividad del fluido y la movilidad de las moléculas a migrar en el gel.
¿Cómo preparar gel de agarosa 1\%?
Para preparar un gel de agarosa al 1\% se debe pesar 1g de agarosa y este se disuelve en 100 mL de buffer TAE 1X o TBE 1X (ver tabla de Comparación de buffers). Caliente la mezcla contenida en un matraz ex profeso, en un horno de microondas dando pulsos de 30 segundos hasta lograr una mezcla homogénea.
¿Cómo se separan las moléculas del gel?
Con base en su tamaño y carga, las moléculas se desplazarán por el gel en diferentes direcciones o a distintas velocidades, con lo que se separan unas de otras. [¿De dónde viene el nombre «electroforesis»?] Todas las moléculas de ADN tienen la misma cantidad de carga por masa.
¿Por qué es importante el tampón?
El tampón, al proporcionar un depósito de ácido y base débiles, también mantiene el pH dentro de un rango estrecho. Esto es importante porque la estructura y la carga de una proteína o ácido nucleico cambiarán si se someten a cambios significativos de ph, evitando así la separación adecuada.
¿Cómo se utiliza el glicerol en el tampón de carga?
El glicerol (glicerina) se utiliza como agente denso en la composición del tampón de carga. La muestra + tampón de carga se deposita al fondo del pocillo y no difunde por el tampón que llena la cubeta y cubre el gel. De ese modo no se pierde y se mantiene concentrada.
¿Por qué los fragmentos de ADN atraviesan el gel más rápido que los grandes?
Puesto que todos los fragmentos de ADN tienen la misma cantidad de carga por masa, los fragmentos pequeños atraviesan el gel más rápido que los grandes. Cuando un gel se tiñe con un pigmento que se une al ADN, los fragmentos de ADN pueden verse como bandas, las cuales representan un grupo de fragmentos de ADN del mismo tamaño.