¿Cómo se prepara el gel de agarosa?
Para preparar un gel de agarosa al 1\% se debe pesar 1g de agarosa y este se disuelve en 100 mL de buffer TAE 1X o TBE 1X (ver tabla de Comparación de buffers). Caliente la mezcla contenida en un matraz ex profeso, en un horno de microondas dando pulsos de 30 segundos hasta lograr una mezcla homogénea.
¿Cómo preparar gel de agarosa al 2\%?
Por ejemplo, un gel al 2\% sería 2 gramos de agarosa en polvo disueltos en 100 ml de tampón. Como podéis comprobar, la concentración se obtienen mediante la relación peso/volumen. Sencillo. Se procede a mezclar la agarosa con el tampón y fusionar los componentes para obtener el gel.
¿Por qué los fragmentos de ADN atraviesan el gel más rápido que los grandes?
Puesto que todos los fragmentos de ADN tienen la misma cantidad de carga por masa, los fragmentos pequeños atraviesan el gel más rápido que los grandes. Cuando un gel se tiñe con un pigmento que se une al ADN, los fragmentos de ADN pueden verse como bandas, las cuales representan un grupo de fragmentos de ADN del mismo tamaño.
¿Cómo saber cuántos pares de bases tiene un fragmento de ADN?
Cuando un gel se tiñe con un pigmento que se une al ADN y se coloca bajo luz UV, los fragmentos de ADN brillarán, lo cual nos permite ver el ADN presente en distintos lugares a lo largo del gel. El pb que está al lado de cada número en el marcador indica cuántos pares de bases tiene el fragmento de ADN.
¿Qué es la electroforesis en gel?
La electroforesis en gel es una técnica utilizada para separar fragmentos de ADN según su tamaño. Las muestras de ADN se cargan en pozos (ranuras) en un extremo de un gel y se aplica una corriente eléctrica para arrastrarlas a través del gel.
¿Cuál es la diferencia entre los fragmentos cortos y los grandes del gel?
Conforme corre el gel, los fragmentos más cortos de ADN viajarán más rápido a través de los poros de la matriz del gel que los fragmentos más grandes. Después de un rato que ha corrido el gel, los fragmentos más cortos de ADN estarán más cerca del extremo positivo del gel y los más largos se mantendrán cerca de los pozos.